CH683103A5 - Fermenti lattici in associazione simbiotica, preparazione di un concentrato e loro impiego nella preparazione di prodotti alimentari e dietetico-therapeutici. - Google Patents

Fermenti lattici in associazione simbiotica, preparazione di un concentrato e loro impiego nella preparazione di prodotti alimentari e dietetico-therapeutici. Download PDF

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CH683103A5
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CH1253/87A
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Claudio Rottigni
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Sperimentale Del Latte S R L C
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Description

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Descrizione
La presente invenzione ha per oggetto una associazione simbiotica di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali, in forma concentrata ed essiccata, il loro impiego nella produzione di prodotti lattiero-caseari ed alimentari in genere ad uso umano e animale, così come un procedimento per ottenerla.
E1 noto che Lactobacillus bulaaricus e Streptococcus thermophilus si possono trovare nel latte e nei derivati del latte, ad esempio nello yoghurt, e che possono servire come una coltura di starter per questi prodotti. L'impiego di una miscela di L. bulgaricus e S. thermophilus per produrre formaggio e/o yoghurt è noto da tempo. Così nel UK 1 464 617 viene descritto un procedimento per preparare formaggi a pasta filata del tipo mozzarella, scamorza e provolone, nei quale si impiega una miscela di L. bulgaricus e fi. thermophilus. Qui è però necessario l'ottenimento di cagliata, che viene poi separata dal siero ad un pH di 5,6-6,2 e tenuta a 33-65°C in modo da far abbassare il pH fino a quando esso raggiunge un valore adatto per ottenere la pasta filata. Questo procedimento non è applicabile a formaggi di pasta molle, ad esempio gorgonzola, e la miscela di starter, anche se non espressamente dichiarato, è presumibilmente una miscela liquida. Il FR 2 161 766 descrive la preparazione di derivati del latte utilizzando una miscela liquida di L. bulçiaricus e S. thermophilus. ma in questo caso viene aggiunto anche Lactobacillus casei in forma concentrata e congelata.
L'addizione di L. casei ad una miscela dei due batteri lattici menzionati sopra, è descritta anche nel EP 78 813. Anche qui la miscela di L. bulgaricus e S. thermophilus è allo stato liquido, il procedimento è diretto verso la preparazione di formaggi magri e L. casei viene aggiunto per aiutare l'idrolisi delle proteine.
Nel DE 2 657 418 viene infine descritta la preparazione di derivati dietetici del latte utilizzando una miscela di L. bulgaricus e S. thermophilus. ma anche qui viene ritenuta essenziale l'addizione di altri starter, ad esempio L. casei o Lactobacillus acidophilus.
In nessuno di questi brevetti viene descritta quindi o menzionata una associazione simbiotica di L. bulgaricus e S. thermophilus. tantomeno in forma concentrata ed essiccata, nè si fa alcun accenno ad una loro possibile o eventuale combinazione.
E' tuttavia noto impiegare colture di L. bulgaricus e S. thermophilus in associazione simbiotica, in forma liquida o liofilizzata, con contenuto in cellule di circa 500 milioni/ml o grammo. Così in Nippon Chikusan Gakkai Ho 1982, 53(3), 161-9 vengono descritte le relazioni simbiotiche e antagoniste nello yoghurt tra colture miste di L. bulgaricus e S. thermophilus. Non si fa alcun accenno alla preparazione di queste miscele, al loro impiego nella produzione di prodotti lattiero-caseari nè sul come queste miscele si presentino.
Ad ogni modo, tutte queste colture in forma liquida o liofilizzata, devono essere replicate, prima dell'uso, su un substrato a base di latte o siero di latte, o su altro terreno colturale. Si ottiene così una coltura, chiamata lattofermento o sierofermento, o starter, che serve per la produzione di prodotti lattiero-caseari o alimentari, o in aggiunta a mangimi.
Esistono anche sul mercato colture di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus in associazione simbiotica, in forma concentrata ma congelata (con numero di microorganismi oscillante tra 10 e 100 miliardi/grammo) che vengono impiegate direttamente nel latte da trasformare o in prodotti liquidi. Tutte queste colture hanno però una conservabilità limitata dipendente dal mantenimento e a temperature inferiori a 0°C devono essere mantenute in contenitori di azoto liquido. Ne derivano costi di trasporto e di gestione piuttosto pesanti, che vanno poi inevitabilmente a ripercuotersi sui costi del prodotto finito.
Scopo della presente invenzione era quello di mettere a disposizione un'adatta combinazione di fermenti lattici vivi e vitali che fosse in grado di conservarsi per un lungo periodo di tempo, non subisse variazioni apprezzabili, e potesse essere impiegata nella produzione di formaggi duri o molli senza il bisogno di dover aggiungere altri batteri lattici di specie diversa. Questo scopo ed altri ancora sono stati raggiunti in accordo con la presente invenzione con Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, dove la miscela dei due batteri si presenta come una massa di cellule altamente concentrata ed in forma essiccata che può contenere fino a 100 miliardi di cellule e oltre per grammo, e può essere utilizzata come tale per preparare prodotti alimentari in genere ed agrozootecnici di qualsiasi tipo farmaci e prodotti dietetici senza aggiungere batteri di specie diversa noti per questo scopo.
Il termine «prodotti alimentari in genere» come qui impiegato, include tutti i prodotti alimentari e i vegetali indicati per l'alimentazione umana ed animale. Solo a titolo di esempio si possono così menzionare, come già ricordato, formaggi e latti fermentati, in particolare yoghurt, bevande fermentate, integratori, e così via. Per alcuni di questi prodotti potrebbe rivelarsi utile o opportuno aggiungere alla miscela dell'invenzione altri batteri o loro spore, batteri lattici, lieviti e muffe. Questa eventuale aggiunta non va minimamente a limitare o inficiare l'originalità della presente invenzione, e questa addizione avverrà in forma liquida, congelata o liofilizzata, concentrata e non.
A questo proposito c'è da ricordare che nella presente invenzione con Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus si intendono i due batteri lattici di per sè, così come tutte le denominazioni presenti e successive che saranno attribuite a queste specie microbiche a livello tassonomico.
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E' quindi oggetto della presente invenzione un'associazione simbiotica di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali, in forma concentrata ed essiccata, la quale mantiene tale associazione tra i due batteri anche nella forma essiccata, rimane inalterata per lunghi periodi di tempo a temperature comprese tra 4° e 7°C, è di semplice e facile trasporto, e può essere impiegata come tale per produrre formaggi duri o molli, ed eventualmente yoghurt, senza dover ricorrere all'addizione di batteri lattici di specie diversa come descritto invece in numerosa letteratura. E' infatti sufficiente variare rapporto tra streptococchi e lattobacilli nella miscela, per avere il tipo di formaggio desiderato. Così per avere formaggi più dolci o bevande fermentate (yoghurt) la quantità di streptococchi sarà più elevata rispetto a quella dei lattobacilli, mentre viceversa per avere formaggi più acidi si dovrà tenere più alta la quantità dei lattobacilli. Il rapporto tra i due batteri nella miscela oscillerà quindi entro l'intervallo più ampio, e si potranno avere, a seconda del tipo di formaggio che si vuole produrre, tutte le combinazioni di rapporti che vanno da 1:100 a 100:1.
Ulteriore oggetto della presente invenzione è anche un metodo per preparare questa associazione simbiotica di I- bulgaricus e S. thermophilus. il quale è caratterizzato dal fatto che i due batteri, separatamente o in associazione, vengono inoculati in un terreno colturale a base di latte in polvere e/o siero in polvere, estratto di malto, estratto di lievito, lattosio, fosfato potassico, solfato ammonico, solfato di manganese, citrato sodico enzimi ed urea. E' da tener presente che il terreno colturale viene previamente sterilizzato o pastorizzato e raffreddato alla temperatura ottimale di crescita dei due microorganismi.
Durante l'incubazione la coltura può essere eventualmente tenuta sotto agitazione, mentre si tiene sotto controllo il pH attraverso l'aggiunta di basi organiche o inorganiche. Quando la fermentazione è terminata, la coltura viene raffreddata e poi si centrifuga.
Il concentrato cellulare, contenente le due forme di batteri lattici vivi e vitali in associazione, viene raccolto in un substrato crioprotettore costituito da sostanze che garantiscono la sopravvivenza delle cellule durante l'essiccamento. Questo trattamento viene ottenuto per liofilizzazione o mediante un altro sistema che, eliminando l'acqua dalla massa concentrata, ne garantisce la sopravvivenza delle cellule microbiche. Il prodotto viene utilizzato per la preparazione di prodotti lattiero-caseari secondo tecnologie già note.
Gli esempi che seguono servono ad illustrare ulteriormente l'invenzione e non devono essere ritenuti assolutamente limitativi.
Esempio 1
Preparazione inoculo
Da una coltura conservata secondo i metodi tradizionali (liofilizzato, congelato o forma liquida) si prepara l'inoculo in latte intero, pastorizzato a 90°C per 20-30 minuti, incubando a 45°C per 3-5 ore.
Preparazione madre intermedia
La coltura di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus in associazione simbiotica viene inoculata in ragione dell'1% in un fermentatore contenente un substrato colturale previamente pastorizzato a 90°-100°C per 30 minuti e raffreddato alla temperatura di 43°-45°C, il quale consiste di latte scremato in polvere ricostituito al 10% in acqua.
La durata della fermentazione è di 3-5 ore alla temperatura riportata sopra. Al termine del periodo di fermentazione, la coltura viene raffreddata con acqua gelida ed è pronta per l'inoculo del fermentatore di produzione.
Fermentazione
In questa fase si ha la possibilità di ottenere un prodotto liquido contenente l'associazione simbiotica di L. bulgaricus e S. thermophilus nel rapporto desiderato per le due specie di fermenti lattici. Tale rapporto si mantiene poi inalterato nel prodotto finito concentrato liofilizzato.
a) Rapporto 1:1
Con la madre intermedia si inocula in ragione del 3-5% un substrato colturale previamente sterilizzato in fermentatore a 120°C per 20 minuti il quale contiene:
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siero in polvere
60 g/l lattosio
10 g/l estratto di lievito
10 g/l kh2po4
1 g/l
(NH4)2S04
3 g/l
MnSQ4 • 4H20
0,05 g/l
Prima dell'inoculo, il terreno colturale viene portato a pH 6,5 con ammoniaca liquida al 25% e, dopo la sterlizzazione, esso viene raffreddato a 45°C. La fermentazione procede per 5 ore a questa temperatura, agitando eventualmente la massa, mentre ad intervalli di un'ora si controlla il pH per mantenerlo costante su un valore di 4,8-6,0. Se necessario si aggiunge ammoniaca al 25%. Alla fine della fermentazione il tank viene raffreddato a 4°-6°C con acqua ghiacciata.
Conteggio no. cellule L. bulgaricus: in terreno MRS ~ 500 x 106 /ml UFC
Conteggio no. cellule S. thermophilus: in terreno M17 ~ 500 x 106 /mi UFC
b) Rapporto 1:2,5
Si procede come descritto sotto a), con la differenza che il terreno colturale comprende:
siero in polvere 60 g/l latte scremato in polvere 10 g/l estratto di lievito 5 g/l
(NH4)2S04 3 g/l
MgS04 • 7H20 0,05 g/l
MnS04 • 4H20 0,05 g/l
Prima dell'inoculo, il terreno colturale viene portato a pH 6,0 con acido lattico. Temperatura della fermentazione: 46°C; durata della fermentazione: 5 ore. Ad intervalli di un'ora si controlla il pH per mantenerlo costante su un valore di 4,8-6,0. Se necessario si aggiunge carbonato sodico al 20% in ammoniaca al 20%.
Alla fine della fermentazione il tank viene raffreddato a 4°-6°C con acqua ghiacciata.
Conteggio cellule L. bulgaricus in terreno MRS (pH 5,4) ~ 700 x 106 /mi Conteggio cellule S. thermophilus: in terreno M17 ~ 300 x 106 /mi c) Rapporto 2,5:1
Si procede come descritto sotto a), con la differenza che il terreno colturale comprende:
siero in polvere
60 g/l lattosio
10 g/l citrato sodico
5 gli estratto di lievito
5 g/l
(NH4)2S04
3 g/l kh2po4
1 g/l
MnS04 • 4H20
0,05 g/1
Prima dell'inoculo, il terreno colturale viene portato a pH 6,7 con ammoniaca. Temperatura della fermentazione: 42°C; durata della fermentazione: 5 ore. Ad intervalli di un'ora si controlla il pH per mantenerlo costante sul valore di 4,8-6,5. Se necessario si aggiunge ammoniaca. Si opera poi come descritto in a).
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Conteggio cellule L. bulgaricus: terreno MRS (pH 5,4) ~ 300 x 106 /ml Conteggio cellule S. thermophilus: terreno M17 ~ 700 x 106 ml Concentrazione
Il brodo colturale così ottenuto viene sottoposto ad un processo di concentrazione mediante centrifugazione o ultrafiltrazione, ottenendo una massa cellulare concentrata avente un'umidità del circa 60% e con un volume pari a circa 1/20 dell'originario.
Omogeneizzazione
Il concentrato ottenuto come descritto sopra, viene poi omogeneizzato in una soluzione crioprotettiva nel rapporto 1:2 (1 parte di concentrazione^ parti di soluzione). Questa soluzione crioprotettiva può essere ad esempio costituita da lattosio al 24%, latte scremato in polvere al 20%, lattosio 10% + citrato sodico 5% + glutammato monosodico 2%.
Liofilizzazione
Il prodotto così ottenuto viene caricato mediante una pompa a lobi volumetrica in un apparecchio di liofilizzazione in bacinelle, e congelato ad una temperatura compresa tra -30° e -40°C. Il prodotto viene poi sottoposto a disidratazione fino ad un contenuto in umidità residua del 4-6% alla temperatura di 10°C.
C'è da notare che tutte le operazioni dalla fermentazione compresa in poi vengono condotte in condizioni di sterilità.
Prodotto finito
Il prodotto finito presenta un numero di fermenti lattici eccezionalmente elevato (> 1010 - 1011 UFC/g). Le cellule cresciute in simbiosi si ritrovano nel rapporto verso cui erano state indirizzate nella fase fermentativa, ed inoltre mantengono inalterate le caratteristiche di acidificazione e biochimiche proprie delle colture liquide.
Esempio 2
Applicazione
La preparazione dello yoghurt e dei formaggi descritti qui di seguito è stata ottenuta impiegando dosi di liofilizzato concentrato, contenenti le due forme di batteri lattici vivi e vitali in associazione, corrispondenti a 50 g circa per la lavorazione di 10 quintali di latte. I prodotti finiti ottenuti rispondono ai requisiti del mercato e, nella fase tecnologica, sono stati rispettati i parametri di acidificazione che risultano omologhi a quelli ottenuti impiegando una normale coltura liquida.
Taleggio fi latte viene pastorizzato per 10 secondi a 72°C, si raffredda quindi a 37°C e poi si introduce in una caldaia per formaggio. L'acidità del latte è di 3,1 SH°/50 mi. Si aggiunge l'associazione simbiotica dei due batteri in ragione di 2-3 g/q come liofilizzato concentrato, si introduce caglio (titolo 1/10.000) nella quantità di 40 ml/q e poi si lascia riposare il latte per 20-40 minuti. Durante questo periodo di tempo il latte coagula. La cagliata viene sottoposta a rottura con dispositivi adatti ed infine estratta dalla caldaia e posta in forme apposite per lo spurgo. Il tempo di durata della lavorazione è di circa 1-2 ore. Per verificare il regolare andamento della caseificazione, si effettuano determinazioni dell'acidità del siero che via via va aumentando durante la stasi della cagliata nelle forme, alla temperatura ambiente. Per favorire lo spurgo del siero, la cagliata che man mano si rapprende viene rivoltata ogni mezz'ora ad intervalli regolari. Il formaggio viene portato, dopo circa 5-6 ore di questo trattamento, nelle celle di maturazione a ~ 5°C fino a maturazione avvenuta, che, in genere, è terminata dppo trenta giorni.
Gorgonzola
Il procedimento di preparazione e le tecnologie sono all'incirca le medesime descritte per il formaggio Taleggio, con le seguenti eccezioni. La temperatura di coagulazione è di 30°C, l'aggiunta del caglio è dell'ordine di 30 ml/q, e il tempo di sosta delle forme nella camera calda è allungato a 10-12 ore (invece di 5-6 ore). Oltre all'associazione simbiotica dei due batteri oggetto della presente invenzione, al latte si aggiunge anche Pénicillium roqueforti.
Durante la maturazione del formaggio, dopo 15 giorni dalla produzione, viene effettuata la foratura
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della pasta per consentire alle muffe di svilupparsi e di dare l'aspetto erborinato al formaggio. Il tempo di maturazione totale è di circa 60-70 giorni.
Yoghurt
In un fermentatore da 5000 I si porta latte esente da antibiotici e antifermentativi (acidità 3,2-3,8 SH°/50 mi) e si sottopone a pastorizzazione per trattamento alla temperatura di 92°C per 5 minuti, oppure a 85°C per 30 minuti, o a temperature comprese tra le due precedenti ed a tempi diversi. Il latte viene poi raffreddato a 42°-45°C e inoculato con l'associazione simbiotica dell'invenzione in ragione di circa 50 g/10 q e incubato per 2-6 ore. Il coagulo viene quindi rotto e raffreddato e confezionato. Alternativamente, il latte inoculato con l'associazione simbiotica viene confezionato e le confezioni vengono incubate a 42°-45°C per 3-6 ore e quindi raffreddate in cella frigorifero.
PRODOTTO DIETETICO-TERAPEUTICO
Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali, in associazione simbiotica, in forma concentrata ed essiccata, preparati nel modo descritto sopra, possono essere usati a scopo dietetico e terapeutico sia in forma di polvere che in forma di cialde o compresse.
L'associazione dei due fermenti lattici può essere utilizzata anche per l'arricchimento in batteri lattici di alimenti dietetici destinati all'infanzia e all'uomo come, ad esempio, omogeneizzati (a base di carne, di latte, di formaggio, di frutta, di vegetali) o alimenti per diabetici (marmellate, cioccolate, dolcificanti diversi da saccarosio, ecc.).
L'associazione dei due fermenti lattici può essere miscelata con i preparati sopra riportati in diverse proporzioni. L'aggiunta di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus in forma concentrata essiccata, negli alimenti, è giustificata dal fatto che questo prodotto possiede proprietà di equilibratore della flora intestinale e di stimolatore delle proprietà immunologiche oltre che per le eventuali proprietà antitumorali e di stimolazione delle difese naturali dell'organismo.
Esempio di preparazione:
- Omogeneizzati per l'infanzia: miscelare 1 grammo di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali, in associazione simbiotica, in forma concentrata ed essiccata, con 50-100 g di omogeneizzato.
- Compresse: miscelare 1 grammo dei due fermenti lattici in oggetto vivi e vitali, in associazione simbiotica, in forma concentrata ed essiccata, con gli eccipienti necessari per la formulazione della compressa.
- Cereali: miscelare 1 grammo dei due fermenti lattici in oggetto vivi e vitali, in associazione simbiotica, in forma concentrata ed essiccata, con 50-100 g di cereali (es. crusca).
Esempio 3
a) Preparazione di un mangime per suinetti
- Integratore
In un miscelatore a doppio involucro (o a V) di capacità adeguata si introducono e si miscelano i seguenti ingredienti:
1) supporto costituito da lattosio o siero di latte in polvere o altro
2) Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, in forma concentrata essiccata, in quantità tale da ottenere, ad esempio, una carica microbica di 2 miliardi per grammo di integratore.
- Mangime
L'integratore così ottenuto viene introdotto, nella quantità desiderata, in un miscelatore orizzontale e si miscela con gli altri costituenti del mangime nelle proporzioni di seguito elencate:
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- latte scremato in polvere
10%
- siero di latte in polvere
5%
- farina di soia
10%
- farina di mais
20%
- farina di pesce
5%
- farina d'orzo
5%
- farina d'avena
2,5%
- fiocchi d'orzo
20%
- fiocchi d'avena
5%
- crusca
15%
- sali minerali
1%
- mix vitaminico
1%
- integratore con fermenti lattici
0,5%
b) Preparazione di un mangime composto integrato sostutivo del latte per vitelli che ovvia anche all'uso di antibiotici
- siero di latte in polvere 85% olio di cocco 8%
- grasso 4% farina di cereali 2% integratore minerale vitaminico 0,5%
- batteri lattici 0,5% pH 5,0 dopo ricostituzione al 10% in acqua.

Claims (13)

Rivendicazioni
1. Procedimento per preparare un concentrato liofilizzato di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, caratterizzato dal fatto che le due specie microbiche vengono inoculate assieme o separatamente in un terreno colturale a base dì latte in polvere e/o siero in polvere, estratto di malto, estratto di lievito, lattosio, fosfato potassico, solfato ammonico, solfato di manganese, citrato sodico, enzimi ed urea, ed incubate in condizioni di temperatura e pH controllati, e/o sotto agitazione; la coltura cresciuta viene raffreddata e centrifugata, ed il concentrato cellulare contenente le due forme di batteri vivi e vitali in associazione viene raccolto in un substrato crioprotettore, ed infine si omogenizza e si essica.
2. Procedimento secondo la rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto, che prima dell'inoculo il terreno viene portato ad un pH compreso fra 6 e 7 con sostanze basiche o acide, inorganiche e/o organiche, sterilizzato per circa 20 minuti e poi raffreddato a 42-46°C.
3. Procedimento secondo la rivendicazione 1 o 2, carattericato, dal fatto che il terreno colturale contiene siero in polvere, lattosio, estratto, di lievito, solfato ammonico, fosfato potassico, solfato di manganese, latte in polvere, citrato sodico.
4. Procedimento secondo una delle rivendicazioni da 1 a 3, caratterizzato dal fatto che durante l'incubazione si controlla ogni ora il valore del pH per mantenerlo sul valore compreso tra 4,5 e 6,5 tramite ammoniaca o altre sostanze basiche organiche ed inorganiche.
5. Procedimento secondo una delle rivendicazioni da 1 a 4, caratterizzato dal fatto che l'incubazione dura da 3 a 6 ore e il raffreddamento viene eseguito a 4-6°C mediante acqua ghiacciata.
6. Procedimento secondo una delle rivendicazioni da 1 a 5, caratterizzato dal fatto che il concentrato cellulare e il substrato crioprotettore vengono mescolati nel rapporto oscillante tra 1:1 e 1:2.
7. Procedimento secondo la rivendicazione 5, caratterizzato dal fatto che il substrato crioprotettore è costituito da sostanze che garantiscono la sopravvivenza delle cellule durante l'essiccamento, in particolare lattosio al 24%, latte scremato in polvere al 20%, lattosio 10% + citrato sodico 5% + glutammato monosodico 2%.
8. Fermenti lattici vivi e vitali in associazione simbiotica, in forma concentrata e liofilizzata, ottenuti
7
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
CH 683 103 A5
secondo il procedimento di una delle rivendicazioni da 1 a 7, per l'impiego nella produzione di prodotti alimentari ad uso umano ed animale.
9. Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, in forma concentrata e liofilizzata, ottenuti secondo una delle rivendicazioni da 1 a 7, per l'impiego nella produzione di tutti i prodotti alimentari, agrozootecnici e vegetali per l'alimentazione umana ed animale e per la produzione di prodotti dietetici e farmaci.
10. Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, in forma concentrata e liofilizzata secondo la rivendicazione 9, assieme ad altri batteri o loro spore, batteri lattici, lieviti e muffe, in forma liquida, congelata o liofilizzata, concentrata e non, per l'impiego nella produzione di prodotti alimentari, agrozootecnici e vegetali.
11. Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus vivi e vitali in associazione simbiotica, in forma concentrata e liofilizzata secondo la rivendicazione 9, caratterizzati dal fatto che il rapporto nella miscela tra i due fermenti oscilla tra 1:100 e 100:1.
12. Impiego dell'associazione simbiotica di Lactobacillus bulgaricus e Streprococcus thermophilus in forme concentrate e liofilizzate preparate secondo il procedimento di una delle rivendicazioni da 1 a 7 per produrre prodotti alimentari, agrozootecnici, vegetali, dietetici e farmaci ad uso umano ed animale.
13. Impiego secondo la rivendicazione 12, caratterizzato dal fatto che i prodotti alimentari sono scelti dal gruppo comprendente formaggi duri e molli, latti fermentati, bevande fermentate, yoghurt e integratori.
8
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